Thurow, C: Biochemische Aufreinigung, funktionelle Analyse u

Cis-regulatorische, as?1-ähnliche Elemente, die von der TGA-Familie der bZIP-DNA-Bindeproteine erkannt werden, vermitteln Salicylsäure- oder Auxin-induzierbare Genexpression in Pflanzen. Sie sind als funktionelle Elemente in einer Reihe von Promotoren enthalten, die im Zuge pflanzlicher Abwehrreaktionen bei einem Pathogenbefall aktiviert werden. Die Salicylsäure stellt bei dieser Pathogenantwort ein entscheidendes Signalmolekül dar.Mehrere Befunde deuten darauf hin, daß eine as?1-Bindeaktivität in Gesamtzellextrakten aus Tabakzellen an der Regulation der Salicylsäure-induzierbaren Genexpression beteiligt ist. Dieser SARP (salicylic acid response protein) genannte Proteinkomplex wurde im Rahmen der vorliegenden Arbeit über seine Bindeaffinität zum as?1-Element aufgereinigt. Als Hauptbestandteil des SARP konnte das Homodimer des TGA-Faktors TGA2.2 identifiziert werden. In geringerer Menge ist zusätzlich TGA2.1 enthalten, der im SARP-Komplex als Heterodimer mit TGA2.2 an die DNA bindet. TGA1a, ein weiterer Vertreter der Tabak-TGA-Faktoren, der möglicherweise an der Auxin-Induktion as?1-ähnlicher Elemente beteiligt ist, war im SARP nicht detektierbar.Es konnte gezeigt werden, daß beide Komponenten des SARP-Komplexes, TGA2.2 und TGA2.1, in der Lage sind, mit NPR1 zu interagieren, einem Schlüsselregulator der Salicylsäure-induzierbaren Genaktivierung in Arabidopsis. TGA1a, der im SARP nicht enthalten ist, wechselwirkte auch nicht mit NPR1.Weitere funktionelle Untersuchungen ergaben, daß sowohl TGA2.1 und TGA1a als auch der wurzelspezifisch exprimierte Tabak-TGA-Faktor TGA7 als Transaktivatoren in der Hefe wir-ken, während sich für TGA2.2, den Hauptbestandteil des SARP-Komplexes, kein endogenes Aktivierungspotential in diesem System nachweisen ließ.Im Hefe-Two-Hybrid-Screen konnte über die Interaktion mit TGA2.1 das NPR1-ähnliche Tabakprotein NtNPR2 identifiziert